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CRISPR/Cas9技术服务


CRISPR/Cas9(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats)是最新出现的一种由RNA指导的Cas9核酸酶对靶向基因进行编辑的技术。CRISPR/Cas9是细菌和古细菌为应对病毒和质粒不断攻击而演化来的获得性免疫防御机制。在这一系统中,crRNACRISPR-derived RNA)通过碱基配对与tracrRNAtrans-activating RNA)结合形成双链RNA,此tracrRNA/crRNA二元复合体指导Cas9蛋白在crRNA引导序列靶定位点切断双链DNA(图2)。在基因组编辑过程中,tracrRNAcrRNA可以融合成为1RNAsgRNA)表达同样可以起到靶向剪切的作用。CRISPR/Cas9的优点是操作简单,对基因组的效率高。需要对某一个靶位点编辑的时候,只需要表达相应的sgRNA即可,不需要对Cas9核酸酶进行改造。它可对任何物种的基因组进行高效率的定向编辑。基因组编辑技术的一个缺点是脱靶效应,可能在靶点以外的地方切断DNA,产生indel。本公司用一个突变的Cas9 Cas9n克服了这个局限,,它只切断DNA的一个链,这个单链缺口会促进同源重组,但不会产生脱靶突变。


发布时间: 2016-01-28



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