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实验动物取样


1.      介绍

动物实验通常用来解决人类疾病研究手段,但也被广泛用来研究生物行为、发育和基础生物功能学研究。实验动物取样是动物实验的关键步骤,取材不当,将直接影响病理诊断和科研工作的效果。因此,对动物实验样本,例如组织、细胞和器官的取样和保存,是体内动物实验的关键。公司提供各种动物的组织样品采集、血液样品收集分析以及初代细胞分离培养等一系列服务,满足客户对科研项目的特定需求。

 

2.      实验动物采血

1.1小鼠、大鼠采血

1.1.1剪尾采血:需血量较少时常用此法。先将动物固定,将鼠尾浸在 45℃左右温水中几分钟或用酒精棉球涂擦鼠尾,使尾部血管充盈,剪去尾尖 12mm(小鼠)或 3—5mm(大鼠),使血液顺血管壁自由流入试管或用血红蛋白吸管吸取。采血结束时,伤口消毒并压迫止血。小鼠每次可取血 0.1ml 左右,大鼠可取血 0.3—0.5ml。

1.1.2 眼眶取血:操作者—手固定小鼠或大鼠,食指和拇指轻轻压迫颈部两侧,使眶后动静脉充血,另一只手持毛细采血管,以 45 度从内眼刺入,并向下旋转,感觉刺入血管后,再向外边退边吸,使血液顺承血管自由流入小管中,当得到所需血量后,放松加于颈部的压力,并拔出采血器,以防穿刺孔出血,若技术熟练,此方法在短期内可重复采血,小鼠一次可取血 0.2—0.3ml 左右,大鼠可取血约 0.5ml。如只进行一次取血,可采用摘眼球法。

1.1.3 断头取血:采血者的左手拇指和食指以背部较紧地握住大鼠或小鼠的颈部皮肤,并作动物头朝下倾的姿势。右手用剪刀猛剪鼠颈,约1/2-4/5的颈部前剪断,让血自由滴入盛器。小鼠可采用约0.8~1.2ml,大鼠约5-10ml。

1.3.4 心脏采血:鼠类的心脏较小,且心率较快,心脏采血比较困难,故少用。活体采血方法与豚鼠相同。若做开胸一次死亡采血,先将动物作深麻醉,打开胸腔,暴露心脏,用针头刺入右心室,吸取血液。小鼠约0.5-0.6ml;大鼠约0.8-1.2ml。

1.3.5 颈动静脉采血:先将动物仰位固定,切开颈部皮肤,分离皮下结缔组织,使颈静脉充分暴露,可用注射器吸出血液。在气管两侧分离出颈动脉,离心端结扎,向心端剪口将血滴入试管内。

1.3.6 腹主动脉采血:最好先将动物麻醉,仰卧固定在手术架上,从腹正中线皮肤切开腹腔,使腹主动脉清楚暴露。用注射器吸出血液,防止溶血。或用无齿镊子剥离结缔组织,夹住动脉近心端,用尖头手术剪刀,剪断动脉,使血液喷入盛器。

 

1.2 豚鼠采血

1.2.1耳缘切口采血:先将豚鼠耳消毒,用刀片割破耳缘,则血可自动流出而进入容器。此法能采血约 0.5ml。

1.2.2背中足静脉采血:将豚鼠后肢关节伸直,提到实验者面前。实验者将动物脚背面用酒精消毒,找出背中是静脉后,用左手拇指和食指拉住豚鼠的趾端,右手持注射针刺入静脉,抽出注射针后即有血液渗出。

1.2.3心脏采血:采血前,将动物麻醉并仰卧固定置实验台上。心前区皮肤脱毛,常规消毒。于左侧第 3、4肋间心尖搏动最强处将针头垂直刺人心脏,由于心谖的搏动,血液可自导致动物很快死亡。经 6—7 天后可重复穿刺采血。

1.3 家兔采血

1.3.1耳缘静脉采血:采量较少时可用此法,是家兔最常用的采血方法,具体方法同耳缘静脉给药。此法一次可采血 5—10ml,可多次重复使用。

1.3.2心脏采血:与豚鼠心脏采血法类似。心脏穿刺部位在第 3 肋骨间隙,胸骨左缘 3mm 处,每次可取血 20—25ml

 

1 实验动物最大安全采血量与最小致死采血量

动物品种

最大安全采血量(ml)

最小致死采血量(ml)

小鼠

0.2

0.3

大鼠

1

2

豚鼠

5

10

兔子

10

40

 

3.      实验动物组织采集

服务包括各器官组织的石蜡切片和冰冻切片。

其中石蜡切片是组织免疫组化最常用、最基本的方法,对于组织形态保存好,且能作连续切片,有利于各种染色对照观察;还能长期存档,供回顾性研究;石蜡切片制作过程对组织内抗原暴露有一定的影响,但可进行抗原修复,是免疫组化中首选的组织标本制作方法。

而冰冻切片是免疫组化中另一常用切片方法。特点是能够完好保存多种抗原的免疫活性,尤其是细胞表面的免疫抗原,保存效果优于石蜡切片。

公司可根据客户需求,对动物组织切片进行各种病理和免疫组化分析。

 

2:实验动物脏器重量值(%

器官

小鼠

大鼠

豚鼠

兔子

平均体重

20g

201-300g

360g

2900g

肝脏

5.18

4.07

4.48

2.10

脾脏

0.38

0.43

0.15

0.30

肾脏

0.88

0.74

0.86

0.25

心脏

0.5

0.38

0.37

0.28

0.74

0.79

0.67

0.58

1.42

0.29

0.92

0.38

甲状腺

0.01

0.0097

0.0164

0.300

胰脏

0.34

0.39

 

0.106

 

4.      实验动物原代细胞分离

凡是来源于胚胎、组织器官及外周血,经特殊分离方法制备而来的初代培养细胞,称为原代细胞。动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件,直接影响细胞的体外培养。

公司服务包括: 皮肤和粘膜取材、内脏和肿瘤取材、血液细胞分离、骨髓、羊水取材、动物组织取材以及动物胚胎取材。经过消化和分离,制备成按客户需求的原代细胞。


发布时间: 2016-01-22



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